Perbanyakan
tanaman pada umumnya dilakukan melalui perbanyakan vegetatif atau generatif.
Salah satu perbanyakan vegetatif yaitu kultur jaringan. Perbanyakan ini
didasari oleh teori totipotensi sel, yang menyatakan bahwa setiap sel memiliki
kemampuan untuk tumbuh dan berkembang menjadi individu baru.
Kultur jaringan merupakan teknik perbanyakan tanaman
dengan cara mengisolasi bagian tanaman seperti daun, mata tunas, serta
menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatan secara aseptik yang kaya
nutrisi dan zat pengatur tumbuh dalam wadah tertutup yang tembus cahaya
sehingga bagian tanaman dapat memperbanyak diri dan bergenerasi menjadi tanaman
lengkap. Prinsip utama dari teknik kultur jaringan adalah perbayakan tanaman
dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman menggunakan media buatan yang
dilakukan di tempat steril.
Metode kultur jaringan dikembangkan untuk membantu
memperbanyak tanaman, khususnya untuk tanaman yang sulit dikembangbiakkan
secara generatif. Bibit yang dihasilkan dari kultur jaringan mempunyai beberapa
keunggulan, antara lain: mempunyai sifat yang identik dengan induknya, dapat
diperbanyak dalam jumlah yang besar sehingga tidak terlalu membutuhkan tempat
yang luas, mampu menghasilkan bibit dengan jumlah besar dalam waktu yang
singkat, kesehatan dan mutu bibit lebih terjamin, kecepatan tumbuh bibit lebih
cepat dibandingkan dengan perbanyakan konvensional.
Keberhasilan perbanyakan tanaman secara in vitro sangat
ditentuka oleh media. Pemilihan media yang tepat, serta komposisi hormon tumbuh
yang sesuai dengan kebutuhan tanaman, sangat menentukan hasil perbanyakan yang
dilakukan. Media perbanyakan tanaman yang umum digunakan secara in vitro ialah
dengan penambahan zat pengatur tumbuh sitokinin tanpa atau penambahan sedikit
auksin.
Masa aklimatisasi merupakan masa keritis bagi
kelangsungan hidup tanaman hasil kultur jaringan. Aklimatisasi adalah satu
tahapan dalam kultur jaringan, yang meerupakan proses adaftasi planlet yang
hidup pada kondi aseptik dan heterotof lalu dipindah ke kondisi yang tidak
aseptik dan harus hidup dalam kondisi autorotof. Tanaman kultur jaringan hampi
tidak pernah berfotosistesis, lapisan kutikula tidak berkembang, jaringan
pembuluh antara akar dan pucuk tidak berkembang serta stomata yang belum
berfungsi dengan baik. Kondisi tersebut membuat tanaman belum dapat bertahan
terhadap proses transpirasi, belum dapat berfotosintesis serta tidak tahan terhadap
serangan mikroorganisme.
Agar mahasiswa mengetahui metode dan teknik-teknik dalam
perbanyakan tanaman secara in vitro (kultur jaringan), media yang digunakan,
dan cara aklimatisasi.
Bahan yang digunakan adalah tanaman kultur steril dan
media MS11 sebagai media tanam. Alat digunakan antara lain yaitu: skalpel,
gunting, petiridish dan pinset steril serta bunset dan alkohol semprot.
Bahan tanaman yang digunakan adalah planlet anggrek yang
sudah berakar dan kapas basah serta media tanam(sekam, arang/akar pakis/sabut
kelapa/kokopit. Alat yang digunakan adalah pinset dan tray.
Pertama yang dilakukan yaitu pembuatan media MS11.
Bahan-bahannya yaitu: Zat pengatur tumbuh (ZPT), usur hara makro dan mikro,
vitamin(B1), asam-asam amino, bahan pemadat media (Agar-agar), aquades.
Kemudian masukkan semua alat tanam, bunset, media dan
bahan kedalam LAFC setelahdisemprot terlebih dahuludengan alkohol 70%. Nyalakan
bunsen. Semua alat tanam dipanaskan dengan cara dibakar pada lampu bunset.
Panaskan kembali setiap akan dipakai dan setelah dipakai. Keluarkan tanaman
dari dalam botol, masukkan ke dalam petiridish yang berisi air steril dan
betadin(catatan, jangan buka petiridish terlalu lebar). Tanaman dipotong
menggunakan gunting atau skalpel menjadi eksplan stek buku tunggal atau eksplan
stek satu tunas aksilar. Tanam eksplan kedalam media MS11. Simpan diruang
kultur (Semua prosedur diatas dilakukan dalam laminar air flow cabinet yang sebelumnya telah disterilisasi dengan
sinar UV selama satu jam dan disemprot alkohol 70%.
Keluarkan
terlebih dahulu planlet dari botol dengan menggunakan pinset. Jangan sampai
tanaman terluka atau akarnya terpotong. Cuci bersih dengan air, lakukan dengan
perlahan dan hati-hati. Bilas berulang kali dan pastikan tidak ada sisa media
agar-agar yang menempel diakar. Basahi kapas dengan air lalu masukkan kedalam
tray. Letakkan tanaman anggrek diatas kapas basah dengan hati-hati, tutupi
akara anggrek dengan kapas basah tersebut. Simpan di ruangan yang terlindung
(Green House/ Paranet). Siram setiap hari untuk menjaga kelembaban media.
No
|
Nama
|
Tumbuh
|
1
|
Ana Yunita
|
3
|
2
|
Fadillah
Ramadhani
|
3
|
3
|
Rimna
Margaretha
|
3
|
4
|
Warzonta
Situngkir
|
2
|
5
|
Hayyu
Fitria Maharani
|
1
|
6
|
Parnando A.
H.
|
1
|
7
|
Hilmi
Zakiri
|
2
|
8
|
Diah Ayu
Permatasari
|
1
|
9
|
Angga
Kurnia Putra
|
2
|
10
|
Trisnata
Nafarudin
|
3
|
11
|
Siti
Nurrohmah
|
2
|
12
|
Kodrat
|
4
|
13
|
Dian Anissa
|
3
|
14
|
Lia Marlina
|
4
|
15
|
Crighory
Sektya
|
1
|
16
|
Bayu Segara
|
3
|
17
|
Pinni
Iyunika S.
|
4
|
18
|
Putri
Darminingsih
|
1
|
19
|
Yhara Putri
Hidayat
|
2
|
20
|
Astri
Anggraeni
|
3
|
21
|
Kiky Firman
Ruhyat
|
1
|
22
|
Zaka Satria
|
1
|
23
|
M. Maulana
Fadillah
|
1
|
24
|
Wildan Dani
|
1
|
25
|
Adhi
Mukhtar
|
2
|
26
|
Adit Aditya
|
2
|
27
|
Harvina
nurul Fatimah
|
0
|
28
|
Ade Ary S.
|
0
|
29
|
Giri dwinanto
|
0
|
30
|
Mutiah
|
0
|
31
|
Niputu
atika
|
0
|
Rata-Rata
|
2
|
Media
|
Daya Tumbuh (100%)
|
Kokofit
|
100
|
Arang + Pakis
|
95
|
Arang sekam
|
96
|
a. Perbanyakan tanamn secara in
vitro
Dalam kultur jaringan hal yang perlu diperhatikan ialah
keseterilan alat dan kehati-hatian dalam melakukan kegiatan. Sebab kegagalan
yang sering ditemukan dalam kultur jaringan khususnya pada praktikum yang telah
dilakukan yaitu kontaminasi oleh cendawan. Hal tersebut dapat terjadi akibat
dari tidak seterilnya alat yang digunakan pada saat melakukan praktikum dan
terbuka lebar dan lama peteridish membuat peluang bakteri semakin besar hinggap
pada planlet. Untuk menunjang daya tumbuh tanaman planlet hal lain yang harus
diperhatikan ialah media yang digunakn. Harus lengkap unsur makro dan mikronya,
ZPT yang digunakan harus sesuai dan juga harus bebas dari kontaminasi.
Dalam praktikum yang telah dilakukan, media yang paling
baik digunakan ialah media kokofit. Media kokofit merupakan media yang paling
baik dalam menjaga kelembaban, selain itu media kokofit juga media yang paling
mudah untuk ditanami planlet. Hal ini terlihat dari data, dimana planlet yang
mati pada media arang + pakis maupun arang sekam diakibatkan rusaknya perakaran
planlet dan kekeringan juga terjadi paling cepat pada media tersebut.
Gunawan, L.W. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan.
Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Undang,DKK. 2012. Penuntun Praktik Pembibitan Tanaman
Hortikultura. Institut Pertanian Bogor.Bogor
DATA AKLIMATISASI TIB A2
|
|
Media
|
Ulangan
|
Jumlah
Tanam
|
Jumlah
Tumbuh
|
Daya Tumbuh
(%)
|
Kokofit
|
1
|
2
|
2
|
100
|
2
|
2
|
2
|
100
|
3
|
2
|
2
|
100
|
4
|
2
|
2
|
100
|
5
|
2
|
2
|
100
|
6
|
2
|
2
|
100
|
7
|
2
|
2
|
100
|
8
|
2
|
2
|
100
|
9
|
2
|
2
|
100
|
10
|
2
|
2
|
100
|
11
|
2
|
2
|
100
|
12
|
2
|
2
|
100
|
13
|
2
|
2
|
100
|
14
|
2
|
2
|
100
|
15
|
2
|
2
|
100
|
16
|
2
|
2
|
100
|
17
|
2
|
2
|
100
|
18
|
2
|
2
|
100
|
19
|
2
|
2
|
100
|
20
|
2
|
2
|
100
|
21
|
2
|
2
|
100
|
22
|
2
|
2
|
100
|
23
|
2
|
2
|
100
|
24
|
2
|
2
|
100
|
25
|
2
|
2
|
100
|
26
|
2
|
2
|
100
|
27
|
2
|
2
|
100
|
28
|
2
|
2
|
100
|
29
|
2
|
2
|
100
|
30
|
2
|
2
|
100
|
31
|
2
|
2
|
100
|
Rata-rata
|
100
|
Arang+pakis
|
1
|
2
|
2
|
100
|
2
|
2
|
2
|
100
|
3
|
2
|
2
|
100
|
4
|
2
|
2
|
100
|
5
|
2
|
2
|
100
|
6
|
2
|
2
|
100
|
7
|
2
|
2
|
100
|
8
|
2
|
2
|
100
|
9
|
2
|
2
|
100
|
10
|
2
|
1
|
50
|
11
|
2
|
2
|
100
|
12
|
2
|
2
|
100
|
13
|
2
|
2
|
100
|
14
|
2
|
2
|
100
|
15
|
2
|
2
|
100
|
16
|
2
|
2
|
100
|
17
|
2
|
2
|
100
|
18
|
2
|
2
|
100
|
19
|
2
|
2
|
100
|
20
|
2
|
2
|
100
|
21
|
2
|
2
|
100
|
22
|
2
|
2
|
100
|
23
|
2
|
2
|
100
|
24
|
2
|
2
|
100
|
25
|
2
|
2
|
100
|
26
|
2
|
2
|
100
|
27
|
2
|
2
|
100
|
28
|
2
|
2
|
100
|
29
|
2
|
2
|
100
|
30
|
2
|
2
|
100
|
31
|
2
|
2
|
100
|
Rata-rata
|
98,4
|
Arang Sekam
|
1
|
1
|
1
|
100
|
2
|
1
|
1
|
100
|
3
|
1
|
1
|
100
|
4
|
1
|
1
|
100
|
5
|
1
|
1
|
100
|
6
|
1
|
1
|
100
|
7
|
1
|
0
|
0
|
8
|
1
|
1
|
100
|
9
|
1
|
1
|
100
|
10
|
1
|
1
|
100
|
11
|
1
|
0
|
0
|
12
|
1
|
1
|
100
|
13
|
1
|
1
|
100
|
14
|
1
|
1
|
100
|
15
|
1
|
1
|
100
|
16
|
1
|
0
|
0
|
17
|
1
|
1
|
100
|
18
|
1
|
1
|
100
|
19
|
1
|
1
|
100
|
20
|
1
|
1
|
100
|
21
|
1
|
1
|
100
|
22
|
1
|
1
|
100
|
23
|
1
|
1
|
100
|
24
|
1
|
1
|
100
|
25
|
1
|
1
|
100
|
26
|
1
|
1
|
100
|
27
|
1
|
1
|
100
|
28
|
1
|
1
|
100
|
29
|
1
|
1
|
100
|
30
|
1
|
1
|
100
|
31
|
1
|
1
|
100
|
Rata-rata
|
90,3
|
